A Rapid Virus Neutralization Assay for Newcastle Disease Virus with the Swine Testicular Continuous Cell Line

Publication Type:Journal Article
Year of Publication:1999
Authors:Reynolds, DL, Maraqa, AD
Journal:Avian Diseases
Volume:43
Date Published:1999
ISBN Number:00052086
Keywords:Macaca mulatta
Abstract:

Five continuous cell lines, swine testicular (ST), human rectal tumor (HRT 18), fetal rhesus monkey kidney (MA104), bovine turbinate (BT), and quail tracheal (QT35), were evaluated and compared with chicken embryo fibroblasts (CEFs) for their ability to propagate B1 or Texas GB strains of Newcastle disease virus (NDV). The NDV Texas GB strain replicated in all the continuous cell lines used in this study. Only the ST and QT35 cells produced a cytopathic effect (CPE) similar to that produced in CEFs. However, the ST cell line remained attached while displaying CPE, whereas infected QT35 cells detached, as did the CEFs. The B1 strain of NDV replicated in ST cells, MA104 cells, and CEFs but with less CPE as compared with the Texas GB strain. Pretreatment with trypsin did not enhance CPE with either NDV strain at the level tested. Sera evaluated for neutralizing antibody titers to NDV were significantly higher in titer when the ST cell line was used and compared with CEFs. A high correlation was found between the microscopic examination and the tetrazolium dye (MTT) microassay methods for determining the viral neutralization endpoint, thus suggesting the ST cell line and MTT microassay could be used as an alternative to CEFs and microscopic examination for evaluating neutralizing antibodies titers to NDV. /// Se evaluaron y compararon cinco líneas celulares contínuas de testículo de cerdo (ST), tumor rectal humano (HRT 18), riñón de feto de mono rhesus (MA104), cornetes nasales de bovino (BT) y tráquea de codornices (QT35), con fibroblastos de embrión de pollo por su capacidad de propagar las cepas B1 y Texas GB del virus de Newcastle. La cepa Texas GB se propagó bien en todas las líneas celulares utilizadas en este estudío. Las células de testiculo de cerdo y las células QT-35 produjeron efecto citopatogénico similar al producido en fibroblastos de embrión de pollo. Sin embargo, las células de testículo de cerdo permanecieron adheridas cuando el efecto citopatogénico estaba ocurriendo, mientras que las células QT-35 infectadas se despegaron como lo hicieron los fibroblastos de embrión de pollo. La cepa B1 del virus de Newcastle se propagó en células de testículo de cerdo, en células MA104 y en células de fibroblasto de embrión de pollo, pero mostró menor efecto citopatogénico comparado con la cepa Texas GB. El tratamiento previo con tripsina no aumentó el efecto citopatogénico con ninguna de las cepas de Newcastle en este estudio. Las muestras de suero evaluadas para titulos de anticuerpos neutralizantes para el virus de Newcastle tuvieron titulos significantemente más altos utilizando células de testículo de cerdo y comparándolas con los fibroblasto de pollo. Se observó una correlación alta entre los métodos de examen al microscopio y la micropueba con la tinción de tetrazolio para determinar la dilución final de la neutralización viral, sugiriendo que las células de testículo de cerdo y la microprueba con la tinción de tretazolio puede ser usada como alternativa a los fibroblastos de embrión de pollo y al examen al microscopio para la evaluación de los títulos de anticuerpos neutralizantes contra el virus de Newcastle.

URL:http://www.jstor.org/stable/1592657
Taxonomic name: 
Thu, 2014-03-20 12:58 -- admin
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